近日,生物与制药工程学院生物基础教研室尹锐副教授团队开发了一种基于 TaqMan MGB 探针法的双重一步实时 RT-PCR 技术,能够实现对野生型猪瘟病毒(CSFV)与猪瘟疫苗株(HCLV)的快速、准确鉴别。相关研究成果发表在国际兽医类期刊《Veterinary Sciences》(中国科学院二区)上,文章第一作者为我院2020级生物工程本科生张永哲,尹锐老师为通讯作者。
在猪瘟防控工作中,快速区分野毒感染和疫苗免疫对于疫情监控和流行病学调查具有重要意义。为了快速、准确地区分野生型猪瘟病毒和猪瘟疫苗株,本研究设计了一种基于实时 RT-PCR 的检测方法。该方法采用猪瘟病毒的通用引物,能够同时检测野生型 CSFV 毒株和疫苗株,并针对 NS3 基因设计了两种 TaqMan-MGB 探针,实现对这两类毒株的精准区分。该研究建立的双重 TaqMan-MGB 探针的 RT-qPCR 方法可快速、准确地检测并鉴定 CSFV 和 HCLV。该方法对 CSFV 和 HCLV 具有高度特异性,不会与其他猪常见易感病原体发生交叉反应。其对 CSFV 和 HCLV NS3 基因的检测灵敏度可达 1.67×101 拷贝/μL。精密度测试表明,该方法的重复性和再现性均小于2%。该方法已成功应用于接种过猪瘟疫苗猪的多种样本的快速检测。该研究成果对推动猪瘟病毒快速检测,助力猪瘟这种猪重大传染病的防控具有重要意义。该研究获得吉林省科技发展计划项目的支持。
近年,尹锐老师团队在医学分子诊断领域、动物疫病基因检测领域取得了丰硕的研究成果,与企业合作开发多项分子诊断新技术、新产品;未来一年,这些研究成果将陆续得到产业化应用。
原文链接:https://doi.org/10.3390/vetsci11070289

图. 检测方法的特异性。
(A) CSFV 的检测结果 (B) HCLV 的检测结果
第一作者

张永哲,2020级生物工程专业本科生,主要研究方向为分子诊断试剂的研究与开发。本科期间发表SCI论文5篇(其中,以第一作者身份发表SCI论文2篇)。授权国家发明专利1项,实用新型专利1项。获大学生“互联网+”大赛省赛金奖1项,“挑战杯”大学生课外学术科技作品省赛二等奖1项。目前为吉林农业大学预防兽医学专业硕士研究生在读。
通信作者

尹锐,博士,副教授,硕士研究生导师。主要从事分子诊断试剂研究与开发工作。主持在研吉林省科技发展计划课题1项,长春市科技发展计划课题2项;骨干参加吉林省科技发展计划课题5项。以第一作者和通信作者发表SCI论文17篇(其中中国科学院一区和二区论文11篇);授权国家发明专利 2 项,实用新型专利7项。成功开发磁珠法核酸提取试剂盒11项,开发重大动物传染病基因检测试剂盒20余个。指导国家级大学生科技创新5项;指导大学生获“互联网+”大赛金奖4项、银奖3项。
编辑:肖长昊
初审:李晟毅
复审:李晨光
终审:宋 宇